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用于提取细胞外囊泡的常见液体样本初步分离
来源:湖北省细胞外囊泡学会 2024-11-07

用于提取细胞外囊泡的常见液体样本的初步分离

目的

对用于提取细胞外囊泡的液体样本进行初步分离,去除细胞、细胞碎片以及聚合物和凋亡小体等杂质

仪器

离心机

材料

液体样本

实验方法

细胞培养上清

  1. 500 × g,5 min,去除细胞,保留上清液;

  2. 3,000 × g,20 min,离心2次,去除细胞碎片和粒径较大的EVs,保留上清液;

  3. 初离后细胞培养上清的保存:4 ℃(7天以内),-20 ℃(1月以内),-80 ℃(长期储存)

血液

  1. 血液样本需在室温下及时处理(低温会影响血细胞释放EVs);

  2. 1,550 × g,15 min,室温,离心2次,弃下层血细胞,保留上清液;

  3. 将离心获得的上清液进行分装,-80 ℃长期保存。

唾液

  1. 收集唾液于50 ml离心管中,如不能及时预处理,可在4 ℃临时保存;

  2. 2,600 × g,4 ℃,离心两次,15 min,弃沉淀;

  3. 将离心获得的上清液进行分装,-80 ℃长期保存。

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密度梯度离心法纯化细胞外囊泡

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细胞外囊泡的CFSE荧光标记实验

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